改进的QuEChERS方法用于鱼肉中孔雀石绿、隐晶绿、结晶紫和隐色结晶紫的快速检测(英文)

学校教务系统

April 2014 chinesejournalofchromatography 419~425

specialissueforthe 30 thanniversaryofchinesejournalofchromatographyandcelebrationofthe 90 thbirthdayofacademicianlupeichang:arti sp.j.1123.2014.01016 corresponding author.tel:8641184379519， 传真： 8641184379539.email:Liang XM liumy @ mail.Tsinghua.edu.cn (Liu mingyang ).foundation item:nationalnaturalscies

Fast analysis of malachite green，leucomalachite green，crystalvioletandleucocrystalvioletinfissuebasedonamodifiedquecherspron

，圩街2

、东学坊二、郭志牟二、

刘明阳1、2、两良新庙2

(1. collegeofenvironmentandchemistryengineering，Dalian Jiaotong University，Dalian 116028，China； 2.keylaboratoryofseparationscienceforanalyticalchemistry，dalianinstituteofchemicalphysics，Chinese Academy of Sciences，dalynces

abstract:triphenylmethanedyesmalachitegreen (mg ) andcrystalviolet ) cv ) have been used as antimicrobial， antiparasiticandantisepticagentsinaquaculture.however，MG and CV， aswellastheirmetabolitesleucomalachitegreen (lmgandleucocrystalviolet ) lcv ) arepotentialmutagensandcarcinogens.thus， theefficientdeterminationofdyeresiduesisofgreatconcern.consideringthecomplexityoftheaquaticproducts， thesamplepretreatmentissignificantfordecreasingmatrixinterferenceandimprovingdetectionsensitivity.in this study， asimpleandrapidquechersprocedurewasdevelopedandcombinedwithplcanalysisforthesimultaneousdeterminationofthefourdyesinfishtistisussussssse sappliedinhplcanalysistoachievegoodpeakshapeandselectivity.thepretreatmethodinvolvedtheeextractionofdd sfromfishtissueandfd esolidphaseextraction(DSPE ) material. The extraction volume， extractiontimeaswellasdspematerialsweresystematicallyoptimized.theresultsindicatedthatreversedphase/stronganionexchange (sorbentinthedspeprocedurecouldeffectivelyimprovetherecoverycomparedwithconventionalc 18 orc 18 incorporporatedwedｔｉｍｉｚｅｄ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ， ｇｏｏｄ ｌｉｎｅａｒｉｔｙ ｗａｓ ａｃｈｉｅｖｅｄ ｉｎ ｔｈｅ ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ ｒａｎｇｅ ｏｆ ０􀆰 ５－１００ ｍｇ ／ Ｌ ｗｉｔｈ Ｒ２ｇｒｅａｔｅｒ

ｔｈａｎ ０􀆰 ９９８． Ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ｗｅｒｅ ７３％－９１％ ａｎｄ ｔｈｅ ｐｒｅｃｉｓｉｏｎｓ ｗｅｒｅ ０􀆰 ６６％－５􀆰 ４１％． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ ｔｈｅｆｅａｓｉｂｉｌｉｔｙ ａｎｄ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｏｆ ＱｕＥＣｈＥＲＳ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ ｗｉｔｈ ＨＰＬＣ ｆｏｒ ｄｙｅ ｍｏｎｉｔｏｒｉｎｇ．Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ＱｕＥＣｈＥＲＳ； ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ （ＨＰＬＣ）； ｍａｌａｃｈｉｔｅ ｇｒｅｅｎ； ｌｅｕｃｏｍａｌａｃｈｉｔｅｇｒｅｅｎ； ｃｒｙｓｔａｌ ｖｉｏｌｅｔ； ｌｅｕｃｏｃｒｙｓｔａｌ ｖｉｏｌｅｔ； ｆｉｓｈ ｔｉｓｓｕｅＣＬＣ ｎｕｍｂｅｒ： Ｏ６５８ Ｄｏｃｕｍｅｎｔ ｃｏｄｅ： Ａ Ａｒｔｉｃｌｅ ＩＣ：１０００⁃８７１３（２０１４）０４⁃０４１９⁃０７改进的 ＱｕＥＣｈＥＲＳ 方法用于鱼肉中孔雀石绿、隐色孔雀石绿、

结晶紫和隐色结晶紫的快速检测

朱程云１，２， 魏 杰２， 董雪芳２， 郭志谋２， 刘名扬１，２∗， 梁鑫淼２∗（１． 大连交通大学环境与化学工程学院， 辽宁 大连 １１６０２８；２． 中国科学院大连化学物理研究所 分离分析化学重点实验室， 辽宁 大连 １１６０２３）摘要：孔雀石绿（ＭＧ）和结晶紫（ＣＶ）具有抗菌等活性，常被违法用于水产养殖业。 但 ＭＧ、ＣＶ 及其代谢产物隐色孔雀石绿（ＬＭＧ）、隐色结晶紫（ＬＣＶ）具有致癌性。 所以水产品中染料的残留检测是食品安全分析的重要问题。 由于水产品基质复杂，样品前处理尤为重要。 本文发展了一种基于 ＱｕＥＣｈＥＲＳ 技术与高效液相色谱联用的方法，用于鱼肉中 ４ 种染料的同时检测。 对 ＱｕＥＣｈＥＲＳ 方法中提取剂体积、提取次数以及分散固相萃取材料进行了优化。结果表明反相／ 强阴离子交换材料（Ｃ１８ＳＡＸ）能有效提高回收率。 在最优条件下，４ 种染料在 ０􀆰 ５ ～ １００ ｍｇ ／ Ｌ 范围色 谱 第 ３２ 卷内线性良好，相关系数均大于 ０􀆰 ９９８。

职教二十条

关键词：ＱｕＥＣｈＥＲＳ；高效液相色谱；孔雀石绿；隐色孔雀石绿；结晶紫；隐色结晶紫；鱼肉组织Ｍａｌａｃｈｉｔｅ ｇｒｅｅｎ （ＭＧ） ａｎｄ ｃｒｙｓｔａｌ ｖｉｏｌｅｔ （ＣＶ），ｗｈｉｃｈ ａｒｅ ｔｒｉｐｈｅｎｙｌｍｅｔｈａｎｅ ｄｙｅｓ， ｈａｖｅ ｂｅｅｎｗｉｄｅｌｙ ｕｓｅｄ ｉｎ ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅ ａｓ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ， ａｎ⁃ｔｉｐａｒａｓｉｔｉｃ ａｎｄ ａｎｔｉｓｅｐｔｉｃ ａｇｅｎｔｓ ｉｎ ｔｈｅ ｐａｓｔ ｄｅｃ⁃ａｄｅｓ ［ １， ２］． Ｔｈｅ ｍａｊｏｒ ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅｓ ｏｆ ＭＧ ａｎｄＣＶ， ｌｅｕｃｏｍａｌａｃｈｉｔｅ ｇｒｅｅｎ （ＬＭＧ） ａｎｄ ｌｅｕｃｏｃｒｙｓ⁃ｔａｌ ｖｉｏｌｅｔ （ＬＣＶ） ｐｏｓｓｅｓｓ ｓｉｍｉｌａｒ ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｃｈａｒａｃ⁃ｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ［３］． Ｏｗｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅｉｒ ｐｏｔｅｎｔｉａｌ ｃａｒｃｉｎｏｇｅ⁃ｎｉｃｉｔｙ， ｔｈｅ ａｄｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ＭＧ ａｎｄ ＣＶ ｉｎ ａｑｕａｃｕｌｔｕｒｅｉｓ ｎｏｗａｄａｙｓ ａｂｓｏｌｕｔｅｌｙ ｆｏｒｂｉｄｄｅｎ ［１，４］． Ｈｏｗｅｖ⁃ｅｒ， ｉｌｌｅｇａｌ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｙｅｓ ｓｔｉｌｌ ｅｘｉｓｔｓ ｂｅｃａｕｓｅｔｈｅｙ ａｒｅ ｃｈｅａｐ ａｎｄ ｅｆｆｉｃｉｅｎｔ ［５］． Ｔｈｕｓ， ｍｕｌｔｉ⁃ｒｅｓ⁃ｉｄｕｅｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｄｙｅｓ ｉｎ ａｑｕａｔｉｃ ｐｒｏｄｕｃｔｓ ｉｓｏｆ ｇｒｅａｔ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｃｅ．Ｃｏｎｓｉｄｅｒｉｎｇ ｔｈｅ ｃｏｍｐｌｅｘｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｔｒｉｘ ｉｎａｑｕａｔｉｃ ｐｒｏｄｕｃｔｓ， ｓａｍｐｌｅ ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｆｏｒ ｄｅｃｒｅａ⁃ｓｉｎｇ ｏｒ ｅｌｉｍｉｎａｔｉｎｇ ｍａｔｒｉｘ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ａｎｄ ｉｍｐｒｏ⁃ｖｉｎｇ ｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｉｓ ｏｆ ｇｒｅａｔ ｃｏｎｃｅｒｎ．Ｎｕｍｅｒｏｕｓ ｓａｍｐｌｅ ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｍｅｔｈｏｄｓ ｈａｖｅｂｅｅｎ ｅｓｔａｂｌｉｓｈｅｄ ｉｎ ｐｒｅｖｉｏｕｓ ｒｅｐｏｒｔｓ ［６－１１］． Ｔｒａ⁃ｄｉｔｉｏｎａｌ ｌｉｑｕｉｄ⁃ｌｉｑｕｉｄ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｍｅｔｈｏｄ ｃａｎ ｂｅｅａｓｉｌｙ ｒｅａｌｉｚｅｄ ａｌｔｈｏｕｇｈ ｉｔ ｃｏｎｓｕｍｅｓ ｌａｒｇｅ ｖｏｌｕｍｅｏｆ ｓｏｌｖｅｎｔｓ ［ ６］． Ｅｎｚｙｍｅ⁃ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｅ ｓｏｒｂｅｎｔａｓｓａｙ （ＥＬＩＳＡ） ［１２－１４］ ｅｘｈｉｂｉｔｓ ｇｏｏｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ，ｂｕｔ ｉｔ ｓｕｆｆｅｒｓ ｆｒｏｍ ｆａｌｓｅ ｐｏｓｉｔｉｖｅ ｒｅｓｕｌｔｓ． Ｓｏｌｉｄｐｈａｓｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ （ ＳＰＥ ） ｉｓ ａ ｔｉｍｅ⁃ｃｏｎｓｕｍｉｎｇｍｅｔｈｏｄ ａｌｔｈｏｕｇｈ ｔｈｅ ｍａｔｒｉｘ ｉｎｔｅｒｆｅｒｅｎｃｅ ｃａｎ ｂｅｅｆｆｉｃｉｅｎｔｌｙ ｒｅｍｏｖｅｄ ［１５，１６］． Ｍｏｌｅｃｕｌａｒｌｙ ｉｍｐｒｉｎ⁃ｔｅｄ ｓｏｌｉｄ ｐｈａｓｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ （ ＭＩＳＰＥ） ｆｏｒ ｓａｍｐｌｅｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｒｅｖｅａｌｓ ｇｏｏｄ ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙ． Ｈｏｗｅｖｅｒ，ｔｈｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ＭＩＳＰＥ ｍａｔｅｒｉａｌｓ ｉｓ ｄｉｆｆｉｃｕｌｔ［１７，１８］．ＱｕＥＣｈＥＲＳ， ｒｅｐｒｅｓｅｎｔｉｎｇ ｔｈｅ ａｂｂｒｅｖｉａｔｉｏｎ ｏｆ“ ｑｕｉｃｋ， ｅａｓｙ， ｃｈｅａｐ， ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ， ｒｕｇｇｅｄ ａｎｄｓａｆｅ”， ｈａｓ ｂｅｅｎ ａｃｋｎｏｗｌｅｄｇｅｄ ａｓ ａ ｒａｐｉｄ ａｎｄ ｅｆｆｉ⁃ｃｉｅｎｔ ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｍｅｔｈｏｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆ ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ ｐｅｓｔｉｃｉｄｅｓ ［１９－２３］ ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ ｖｅｔ⁃ｅｒｉｎａｒｙ ｄｒｕｇ ｒｅｓｉｄｕｅｓ ［ ２４， ２５］． Ｔｈｅ ＱｕＥＣｈＥＲＳｐｒｏｃｅｄｕｒｅ ｉｎｖｏｌｖｅｓ ｔｗｏ ｓｔｅｐｓ： （ｉ） ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ／ ｐａｒ⁃ｔｉｔｉｏｎｉｎｇ ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ ｕｓｅ ｏｆ ＮａＣｌ ａｎｄ ＭｇＳＯ４ｆｏｒｓａｌｔｉｎｇ ｏｕｔ， ａｎｄ （ ｉｉ） ｄｉｓｐｅｒｓｉｖｅ ｓｏｌｉｄ ｐｈａｓｅ ｅｘ⁃ｔｒａｃｔｉｏｎ （ｄ⁃ＳＰＥ） ｆｏｒ ｃｌｅａｎ⁃ｕｐ．

Ｉｎ ｃｏｎｓｉｄｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃｉｔｙ ｏｆ ＭＧ，ＬＭＧ， ＣＶ ａｎｄ ＬＣＶ， ｔｈｅ ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｏｆ ＱｕＥＣｈ⁃ＥＲＳ ｆｏｒ ｓａｍｐｌｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ ｉｓ ａｄｖａｎｔａｇｅｏｕｓ ｖｉａｅｘｔｒａｃｔｉｎｇ ｄｙｅ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ｏｒｇａｎｉｃ ｌａｙｅｒ ａｎｄ ｃｌｅａｎｉｎｇ⁃ｕｐ ｂｙ ｄ⁃ＳＰＥ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ． Ｂｙ ｏｐｔｉｍｉｚｉｎｇ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃ⁃ｔｉｏｎ ｖｏｌｕｍｅ， ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅ ａｎｄ ｄ⁃ＳＰＥ ｍａｔｅｒｉ⁃ａｌｓ， ａ ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｍｅｔｈｏｄ ｗａｓ ｄｅｖｅｌ⁃ｏｐｅｄ ｗｈｉｃｈ ｇｒｅａｔｌｙ ｓｉｍｐｌｉｆｉｅｄ ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅ ｐｒｅｐａｒａ⁃ｔｉｏｎ ａｎｄ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｔｈｅ ｔｈｒｏｕｇｈｐｕｔ． Ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｃｏｍ⁃ｂｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｐｒｏｐｏｓｅｄ ＱｕＥＣｈＥＲＳ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅａｎｄ ＨＰＬＣ ｍｅｔｈｏｄ ｂａｓｅｄ ｏｎ ＸＣｈａｒｇｅ Ｃ１８ ｃｏｌ⁃ｕｍｎ， ｔｈｅ ｓｉｍｕｌｔａｎｅｏｕｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ ｏｆ ＭＧ，ＬＭＧ， ＣＶ ａｎｄ ＬＣＶ ｉｎ ｆｉｓｈ ｔｉｓｓｕｅｓ ｗａｓ ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙｒｅａｌｉｚｅｄ．１ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ

１．１ Ｃｈｅｍｉｃａｌｓ ａｎｄ ｍａｔｅｒｉａｌｓ

Ｍａｌａｃｈｉｔｅ ｇｒｅｅｎ （ＭＧ）， ｃｒｙｓｔａｌ ｖｉｏｌｅｔ （ＣＶ） ａｎｄｌｅｕｃｏｃｒｙｓｔａｌ ｖｉｏｌｅｔ （ ＬＣＶ） ｗｅｒｅ ｐｕｒｃｈａｓｅｄ ｆｒｏｍＳｉｇｍａ⁃Ａｌｄｒｉｃｈ （Ｓｔ． Ｌｏｕｉｓ， ＭＯ， ＵＳＡ）； ｌｅｕｃｏｍａｌａ⁃ｃｈｉｔｅ ｇｒｅｅｎ （ＬＭＧ） ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｆｒｏｍ Ｄｒ Ｅｈｒｅｎ⁃ｓｔｏｒｆｅｒ ＧｍｂＨ （Ａｕｇｓｂｕｒｇ， Ｇｅｒｍａｎｙ）． Ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ（ＡＣＮ） ｏｆ ＨＰＬＣ ｇｒａｄｅ ｗａｓ ｐｕｒｃｈａｓｅｄ ｆｒｏｍ Ｍｅｒｃｋ（ Ｄａｒｍｓｔａｄｔ， Ｇｅｒｍａｎｙ ）． Ａｍｍｏｎｉｕｍ ｆｏｒｍａｔｅ（ＮＨ４ＦＡ） ａｎｄ ｆｏｒｍｉｃ ａｃｉｄ （ＦＡ） ｗｅｒｅ ｐｕｒｃｈａｓｅｄｆｒｏｍ Ｊ＆Ｋ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ （ Ｂｅｉｊｉｎｇ， Ｃｈｉｎａ）． Ｗａｔｅｒ ｆｏｒＨＰＬＣ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｗａｓ ｐｕｒｉｆｉｅｄ ｗｉｔｈ ａ Ｍｉｌｌｉ⁃Ｑｓｙｓｔｅｍ （Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ， Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ， ＭＡ， ＵＳＡ）． Ａｌｌ ｏｔｈ⁃ｅｒ ｒｅａｇｅｎｔｓ ｗｅｒｅ ｏｆ ａｎａｌｙｔｉｃａｌ ｇｒａｄｅ ａｎｄ ｕｓｅｄｗｉｔｈｏｕｔ ｆｕｒｔｈｅｒ ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ． Ｒｅｖｅｒｓｅｄ⁃ｐｈａｓｅ ／ｓｔｒｏｎｇ ａｎｉｏｎ⁃ｅｘｃｈａｎｇｅ ｍｉｘｅｄ⁃ｍｏｄｅ ｍａｔｅｒｉａｌ（Ｃ１８ＳＡＸ） （４０ － ７５ μｍ， ｐａｒｔｉｃｌｅ ｓｉｚｅ） ｄｅｓｃｒｉｂｅｄｉｎ ｏｕｒ ｐｒｅｖｉｏｕｓ ｒｅｐｏｒｔ ［２６］ ｗａｓ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ａｓ ｄ⁃ＳＰＥａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｍａｔｅｒｉａｌ． Ｃ１８， ｐｒｉｍａｒｙ ｓｅｃｏｎｄａｒｙ ａ⁃ｍｉｎｅ （ ＰＳＡ） ｍａｔｅｒｉａｌｓ ａｎｄ ＸＣｈａｒｇｅ Ｃ１８ ｃｏｌｕｍｎ（３􀆰 ０ ｍｍ × １００ ｍｍ ｉ． ｄ．， ５ μｍ ｐａｒｔｉｃｌｅｓ） ｗｅｒｅｆｒｏｍ Ａｃｃｈｒｏｍ Ｃｏｒｐ． （Ｂｅｉｊｉｎｇ， Ｃｈｉｎａ）．１．２ ＨＰＬＣ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓＡ Ｈｉｔａｃｈｉ Ｃｈｒｏｍａｓｔｅｒ ＨＰＬＣ ｓｙｓｔｅｍ （ Ｔｏｋｙｏ，Ｊａｐａｎ） ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ ５１１０ ｑｕａｔｅｒｎａｒｙ ｐｕｍｐ， ５２１０·４２０·

第 ４ 期

ＺＨＵ Ｃｈｅｎｇｙｕｎ， ｅｔ ａｌ： Ｆａｓｔ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｍａｌａｃｈｉｔｅ ｇｒｅｅｎ， ｌｅｕｃｏｍａｌａｃｈｉｔｅ ｇｒｅｅｎ， ｃｒｙｓｔａｌｖｉｏｌｅｔ ａｎｄ ｌｅｕｃｏｃｒｙｓｔａｌ ｖｉｏｌｅｔ ｉｎ ｆｉｓｈ ｔｉｓｓｕｅ ｂａｓｅｄ ｏｎ ａ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ＱｕＥＣｈＥＲＳ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅａｕｔｏ ｓａｍｐｌｅｒ， ５３１０ ｃｏｌｕｍｎ ｏｖｅｎ ａｎｄ ５４３０ ｄｉｏｄｅ

ａｒｒａｙ ｄｅｔｅｃｔｏｒ （ ＤＡＤ） ｗａｓ ｅｍｐｌｏｙｅｄ ｆｏｒ ＨＰＬＣａｎａｌｙｓｉｓ． Ｔｈｅ ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｏｎ ａｎＸＣｈａｒｇｅ Ｃ１８ ｃｏｌｕｍｎ． Ｔｈｅ ｃｏｌｕｍｎ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅｗａｓ ｓｅｔ ａｔ ４０ ℃ ａｎｄ ｆｌｏｗ ｒａｔｅ ｗａｓ １ ｍＬ ／ ｍｉｎ． Ｔｈｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎ ｖｏｌｕｍｅ ｗａｓ ２０ μＬ． Ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅｃｏｍｐｏｓｅｄ ｏｆ ＡＣＮ （ Ａ）， ｗａｔｅｒ （ Ｂ ） ａｎｄ １００ｍｍｏｌ ／ Ｌ ａｍｍｏｎｉｕｍ ｆｏｒｍａｔｅ （ ｐＨ ３􀆰 ０， Ｃ）． Ｔｈｅｅｌｕｔｉｏｎ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｗａｓ ０－３ ｍｉｎ， ４０％ Ａ－６５％ Ａ； ３－８ ｍｉｎ， ６５％ Ａ－７５％ Ａ， ｗｈｉｌｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ Ｃ ｗａｓｋｅｐｔ ｃｏｎｓｔａｎｔ ａｔ ２０％ ｔｏ ｏｂｔａｉｎ ａ ｂｕｆｆｅｒ ｃｏｎｃｅｎｔｒａ⁃ｔｉｏｎ ｏｆ ２０ ｍｍｏｌ ／ Ｌ． Ｅａｃｈ ｄｙｅ ｗａｓ ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ａｔｔｈｅ ｍａｘｉｍｕｍ ａｂｓｏｒｐｔｉｏｎ ｗａｖｅｌｅｎｇｔｈ： ６２０ ｎｍ ｆｏｒＭＧ， ５９０ ｎｍ ｆｏｒ ＣＶ， ２６３ ｎｍ ｆｏｒ ＬＣＶ ａｎｄ ＬＭＧ．１．３ Ｓａｍｐｌｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ

Ｃｏｄ ｆｉｓｈ ｗａｓ ｆｒｏｍ ｌｏｃａｌ ｓｕｐｅｒｍａｒｋｅｔ （ Ｄａｌｉａｎ，Ｃｈｉｎａ）． Ｔｈｅ ｓｋｉｎ ａｎｄ ｂｏｎｅ ｗｅｒｅ ｒｅｍｏｖｅｄ． Ｔｈｅｎｔｈｅ ｆｉｓｈ ｗａｓ ｃｕｔ ｉｎｔｏ ｓｔｒｉｐｓ ａｎｄ ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｄ． Ｔｈｅｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｄ ｓａｍｐｌｅ ｗａｓ ｓｔｏｒｅｄ ａｔ －２０ ℃ ｉｎ ｔｈｅｒｅｆｒｉｇｅｒａｔｏｒ ｕｎｔｉｌ ｓａｍｐｌｅ ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ．Ｔｈｅ ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｄ ｃｏｄ ｓａｍｐｌｅ （ ２ ｇ ） ｗａｓｗｅｉｇｈｅｄ ｉｎｔｏ ａ １５ ｍＬ ｐｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ ｔｕｂｅ． Ｔｈｅｎ， ２ｍＬ ｏｆ ａｍｍｏｎｉｕｍ ｆｏｒｍａｔｅ （１００ ｍｍｏｌ ／ Ｌ， ｐＨ ３􀆰 ０）ａｎｄ ３ ｍＬ ｏｆ ＡＣＮ ｗｅｒｅ ａｄｄｅｄ． Ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅ ｗａｓｓｈｏｏｋ ｖｉｇｏｒｏｕｓｌｙ ｔｏ ｅｘｔｒａｃｔ ｔｈｅ ａｎａｌｙｔｅｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅｍａｔｒｉｘ． Ｔｈｅｎ ２ ｇ ｏｆ ｓｏｄｉｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ ｗａｓ ａｄｄｅｄ ｉｎ⁃ｔｏ ｔｈｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｆｏｒ ｐａｒｔｉｔｉｏｎｉｎｇ． Ｔｈｅ ｓａｍｐｌｅ ｗａｓｍｉｘｅｄ ｆｏｒ ａｂｏｕｔ ２ ｍｉｎ ａｎｄ ｃｅｎｔｒｉｆｕｇｅｄ ａｔ ６ ０００ｒ／ ｍｉｎ ｆｏｒ ５ ｍｉｎ． Ａｆｔｅｒ ｔｈａｔ， １ ｍＬ ｏｆ ｓｕｐｅｒｎａｔａｎｔａｎｄ ５０ ｍｇ ｏｆ Ｃ１８ＳＡＸ ｍａｔｅｒｉａｌ ｗｅｒｅ ｔｒａｎｓｆｅｒｒｅｄｉｎｔｏ ａ ２􀆰 ５ ｍＬ ｐｏｌｙｐｒｏｐｙｌｅｎｅ ｔｕｂｅ． Ｔｈｅ ｐｏｌｙｐｒｏｐｙｌ⁃ｅｎｅ ｔｕｂｅ ｗａｓ ｓｈｏｏｋ ａｎｄ ｋｅｐｔ ｉｎ ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ ｂａｔｈｆｏｒ １ ｍｉｎ． Ｔｈｅ ｍｉｘｔｕｒｅ ｗａｓ ｆｉｌｔｅｒｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ０􀆰 ２２μｍ ｍｅｍｂｒａｎｅ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ ｆｉｌｔｒａｔｅ ｗａｓ ｍｉｘｅｄｗｉｔｈ ａｍｍｏｎｉｕｍ ｆｏｒｍａｔｅ （１００ ｍｍｏｌ ／ Ｌ， ｐＨ ３􀆰 ０）ｉｎ ｔｈｅ ｒａｔｉｏ ｏｆ ４ ∶ １ （ ｓａｍｐｌｅ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ∶ ａｍｍｏｎｉｕｍｆｏｒｍａｔｅ， ｖ ／ ｖ）． Ｔｈｅ ｐｒｅｐａｒｅｄ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｗａｓ ｉｎｊｅｃ⁃ｔｅｄ ｉｎｔｏ ｔｈｅ ＨＰＬＣ ｓｙｓｔｅｍ ｆｏｒ ａｎａｌｙｓｉｓ．１．４ Ｓｔａｎｄａｒｄ ａｎｄ ｒｅａｇｅｎｔ ｓｏｌｕｔｉｏｎｓＴｈｅ ｍｉｘｅｄ ｓｔｏｃｋ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｍａｓｓ ｃｏｎｃｅｎｔｒａ⁃ｔｉｏｎ ｏｆ １００ ｍｇ ／ Ｌ ｗａｓ ｄｉｓｓｏｌｖｅｄ ｂｙ ＡＣＮ． Ｉｔ ｗａｓｓｔｏｒｅｄ ａｔ ４ ℃ ａｎｄ ｐｒｏｔｅｃｔｅｄ ａｇａｉｎｓｔ ｌｉｇｈｔ ｆｏｒ ｌｅｓｓｔｈａｎ ｔｗｏ ｗｅｅｋｓ． Ｔｈｅ ｗｏｒｋｉｎｇ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｗａｓ ｐｒｅ⁃ｐａｒｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ｄｉｌｕｔｉｎｇ ｔｈｅ ｓｔｏｃｋ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｈｅｉｎｉｔｉａｌ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ （ ＡＣＮ ∶ ｗａｔｅｒ ∶ １００ ｍｍｏｌ ／ Ｌａｍｍｏｎｉｕｍ ｆｏｒｍａｔｅ ＝ ４０ ∶４０ ∶２０， ｖ ／ ｖ ／ ｖ）． Ｔｈｅ ｃｏｎ⁃ｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｗｏｒｋｉｎｇ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｄｉｌｕｔｅｄ ａｔ０􀆰 ５， １， ５， １０， ２５， ５０ μｇ ／ ｍＬ．

２ Ｒｅｓｕｌｔｓ ａｎｄ ｄｉｓｃｕｓｓｉｏｎ

２．１ Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｉｃ ｍｅｔｈｏｄｓＦｉｇ． １ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｏｆ ｍａｌａｃｈｉｔｅ ｇｒｅｅｎ （ＭＧ）， ｃｒｙｓｔａｌｖｉｏｌｅｔ （ ＣＶ）， ｌｅｕｃｏｍａｌａｃｈｉｔｅ ｇｒｅｅｎ （ ＬＭＧ）ａｎｄ ｌｅｕｃｏｃｒｙｓｔａｌ ｖｉｏｌｅｔ （ＬＣＶ）

Ｔｈｅ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ＭＧ， ＣＶ， ＬＣＶ ａｎｄ ＬＭＧ ｄｙｅｓ（ ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｓｈｏｗｎ ｉｎ Ｆｉｇ． １ ） ｗｈｉｃｈ ａｒｅ ｂａｓｉｃｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｗｉｔｈ ｇｏｏｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｐｅａｋ ｓｈａｐｅｉｓ ｄｉｆｆｉｃｕｌｔ ｏｎ ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ Ｃ１８ ｃｏｌｕｍｎｓ， ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙｆｏｒ ＬＣＶ ａｎｄ ＬＭＧ ［６，２７］． Ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏ ｔｈｅ ｐｒｅｖｉ⁃ｏｕｓ ｓｔｕｄｉｅｓ ｏｆ ｏｕｒ ｇｒｏｕｐ ［２８，２９］， ＸＣｈａｒｇｅ Ｃ１８ｃｏｌｕｍｎ ｄｉｓｐｌａｙｅｄ ｇｒｅａｔ ｓｕｐｅｒｉｏｒｉｔｙ ｉｎ ｔｈｅ ｓｅｐａｒａ⁃ｔｉｏｎ ｏｆ ｂａｓｉｃ ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ． Ｔｈｅｒｅｆｏｒｅ， ＸＣｈａｒｇｅ Ｃ１８ｃｏｌｕｍｎ ｗａｓ ｓｅｌｅｃｔｅｄ ｆｏｒ ｔｈｅ ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ ｏｆ ｔｈｅａｎａｌｙｔｉｃａｌ ｍｅｔｈｏｄ ａｎｄ ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｃｏｎｄｉ⁃ｔｉｏｎｓ ｗａｓ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ． Ａｓ ｓｈｏｗｎ ｉｎ Ｆｉｇ． ２ａ， ｔｈｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓ ｃｏｕｌｄ ｎｏｔ ｂｅ ｗｅｌｌ ｒｅｓｏｌｖｅｄ ｗｉｔｈ ０􀆰 １％（ｖ ／ ｖ） ＦＡ／ Ｈ２Ｏ ｉｎ ｔｈｅ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ａｎｄ ＬＭＧ ｗａｓｎｏｔ ｅｌｕｔｅｄ ｗｉｔｈｉｎ １０ ｍｉｎ． Ｓｉｎｃｅ ｔｈｅ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆｂｕｆｆｅｒ ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｉｓ ａｄｖａｎｔａｇｅｏｕｓ ｆｏｒ ｉｍｐｒｏｖｉｎｇｐｅａｋ ｓｈａｐｅ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｖｉｔｙ， １００ ｍｍｏｌ ／ Ｌ ａｍｍｏｎｉ⁃ｕｍ ｆｏｒｍａｔｅ ｗｉｔｈ ｐＨ ５􀆰 １ ｗａｓ ｅｍｐｌｏｙｅｄ ａｓ ｔｈｅ ｍｏ⁃ｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ａｄｄｉｔｉｖｅ． Ｔｈｅ ｐｅａｋ ｓｈａｐｅｓ ｗｅｒｅ ｉｍ⁃ｐｒｏｖｅｄ， ｂｕｔ ＬＣＶ ａｎｄ ＬＭＧ ｗｅｒｅ ｎｏｔ ｗｅｌｌ ｓｅｐａｒａ⁃ｔｅｄ （Ｆｉｇ． ２ｂ）． Ｗｈｅｎ ｔｈｅ ｐＨ ｖａｌｕｅ ｏｆ ａｍｍｏｎｉｕｍｆｏｒｍａｔｅ ｗａｓ ｃｈａｎｇｅｄ ｔｏ ３􀆰 ０， ｔｈｅ ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅｆｏｕｒ ｄｙｅｓ ｗａｓ ｓｕｃｃｅｓｓｆｕｌｌｙ ａｃｈｉｅｖｅｄ ｉｎ ８ ｍｉｎ ｗｉｔｈｇｏｏｄ ｐｅａｋ ｓｈａｐｅｓ （Ｆｉｇ． ２ｃ）．·４２１·

色 谱 第 ３２ 卷

Ｆｉｇ． ２ Ｄｙｅｓ ｓｅｐａｒａｔｅｄ ｏｎ ＸＣｈａｒｇｅ Ｃ１８ ｃｏｌｕｍｎｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅｓ

Ｍｏｂｉｌｅ ｐｈａｓｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｓ： ａ． ＡＣＮ／ （ ０􀆰 １％ ＦＡ／ ｗａｔｅｒ ）； ｂ．ＡＣＮ／ ｗａｔｅｒ／ １００ ｍｍｏｌ ／ Ｌ ＮＨ４ＦＡ， ｐＨ ５􀆰 １； ｃ． ＡＣＮ／ ｗａｔｅｒ／ １００ｍｍｏｌ ／ Ｌ ＮＨ４ＦＡ， ｐＨ ３􀆰 ０．

２．２ Ｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｅｎｔ ｏｆ ｐｒｅｔｒｅａｔｍｅｎｔ ｍｅｔｈｏｄＴｈｅ ＱｕＥＣｈＥＲＳ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ ｉｓ ｆｌｅｘｉｂｌｅ ａｓ ｉｔ ｐｒｏ⁃ｖｉｄｅｓ ａ ｔｅｍｐｌａｔｅ ｆｏｒ ｓａｍｐｌｅ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ． Ｔｈｅ ｓｏｌ⁃ｖｅｎｔ ａｎｄ ｓｏｒｂｅｎｔ ｃａｎ ｂｅ ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ａｃｃｏｒｄｉｎｇ ｔｏｔｈｅ ｐｒｏｐｅｒｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｔａｒｇｅｔ ａｎａｌｙｔｅｓ． Ｍｏｓｔｌｙ， ｔｈｅ ｏｒ⁃ｇａｎｉｃ ｓｏｌｖｅｎｔ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｐａｒｔｉｔｉｏｎｉｎｇｉｓ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ， ｗｈｉｃｈ ｃａｎ ｅａｓｉｌｙ ｇｅｎｅｒａｔｅ ｐｈａｓｅｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ａｄｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｓｏｄｉｕｍ ｃｈｌｏｒｉｄｅ．Ｉｎ ｔｈｉｓ ｗｏｒｋ， ｔｈｅ ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｓｏｌｖｅｎｔ ａｎｄｔｈｅ ｋｉｎｄ ｏｆ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｓｏｒｂｅｎｔ ｗｅｒｅ ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃａｌｌｙｏｐｔｉｍｉｚｅｄ ｔｏ ｏｂｔａｉｎ ｂｅｓｔ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ａｎｄ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ．２．２．１ Ｏｐｔｉｍｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｐａｒｔｉｔｉｏｎｉｎｇＴｈｅ ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｓｏｌｖｅｎｔ ｉｎ ＱｕＥＣｈＥＲＳｐｒｏｃｅｄｕｒｅ ｄｉｒｅｃｔｌｙ ａｆｆｅｃｔｓ ｔｈｅ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ａｎｄ ｒｅ⁃ｃｏｖｅｒｙ． Ｔｈｅ ｉｎｓｕｆｆｉｃｉｅｎｔ ｓｏｌｖｅｎｔ ｗｏｕｌｄ ｃａｕｓｅ ｉｎ⁃ｃｏｍｐｌｅｔｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ， ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ ｉｎ ｐｏｏｒ ｒｅｃｏｖｅｒｙ，ｗｈｉｌｅ ｅｘｃｅｓｓｉｖｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｓｏｌｖｅｎｔ ｓｅｖｅｒｅｌｙ ｄｉｌｕｔｅｓｔｈｅ ａｎａｌｙｔｅｓ， ｌｅａｄｉｎｇ ｔｏ ｌｏｗ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ．Ｔｏ ｂａｌａｎｃｅ ｔｈｅ ｒｅｃｏｖｅｒｙ ａｎｄ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ， ｔｈｅｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ｆｏｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｏｐｔｉ⁃ｍｉｚｅｄ ｆｒｏｍ ２ ｍＬ ｔｏ ７ ｍＬ． Ａｓ ｓｈｏｗｎ ｉｎ Ｆｉｇ． ３， ｔｈｅｐｅａｋ ａｒｅａｓ ｏｆ ｆｏｕｒ ｄｙｅｓ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｆｒｏｍ ２ ｍＬ ｔｏ ３ｍＬ， ａｎｄ ｔｈｅｎ ｓｌｉｇｈｔｌｙ ｄｅｃｒｅａｓｅｄ ｆｒｏｍ ３ ｍＬ ｔｏ ７ｍＬ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｉｎｄｉｃａｔｅｄ ｔｈａｔ ３ ｍＬ ｏｆ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅｗａｓ ｏｐｔｉｍａｌ ｆｏｒ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｏｆ ｄｙｅｓ ｉｎ ２ ｇ ｏｆｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｄ ｆｉｓｈ ｔｉｓｓｕｅ． Ｍｏｒｅ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ｃｏｕｌｄｎｏｔ ｉｍｐｒｏｖｅ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ ｂｕｔ ｒｅｄｕｃｅｔｈｅ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｓｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙ ｄｕｅ ｔｏ ｔｈｅ ｄｉｌｕｔｉｏｎ ｏｆ ａｎａ⁃ｌｙｔｅｓ． Ｔｈｕｓ ｔｈｅ ｖｏｌｕｍｅ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｓｏｌｖｅｎｔ ｗａｓｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ ｔｏ ｂｅ ３ ｍＬ． Ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｔｉｍｅｗａｓ ｖｅｒｉｆｉｅｄ． Ｔｈｅ ｈｏｍｏｇｅｎｉｚｅｄ ｆｉｓｈ ｔｉｓｓｕｅ （ ２ ｇ）ｗａｓ ｆｉｒｓｔ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｂｙ ２ ｍＬ ｏｆ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ， ａｎｄｔｈｅｎ １ ｍＬ ｏｆ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ ｆｏｒ ｒｅ⁃ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ． Ｔｈｅ ｓｕ⁃ｐｅｒｎａｔａｎｔｓ ｗｅｒｅ ｍｅｒｇｅｄ ａｎｄ ｄｅｔｅｃｔｅｄ． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄ ｎｏ ｏｂｖｉｏｕｓ ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｓ （ ｒｅｓｕｌｔｓ ｎｏｔｓｈｏｗｎ）． Ｓｏ ｔｈｅ ｆｉｓｈ ｔｉｓｓｕｅ ｗａｓ ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｏｎｃｅｗｉｔｈ ３ ｍＬ ｏｆ ａｃｅｔｏｎｉｔｒｉｌｅ．Ｆｉｇ． ３ Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ ｏｆ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｖｏｌｕｍｅ ｏｎ ｔｈｅ ｐｅａｋａｒｅａｓ ｏｆ ｄｙｅｓ

中等职业学校是中专吗

ＺＨＵ Ｃｈｅｎｇｙｕｎ， ｅｔ ａｌ： Ｆａｓｔ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｍａｌａｃｈｉｔｅ ｇｒｅｅｎ， ｌｅｕｃｏｍａｌａｃｈｉｔｅ ｇｒｅｅｎ， ｃｒｙｓｔａｌｖｉｏｌｅｔ ａｎｄ ｌｅｕｃｏｃｒｙｓｔａｌ ｖｉｏｌｅｔ ｉｎ ｆｉｓｈ ｔｉｓｓｕｅ ｂａｓｅｄ ｏｎ ａ ｍｏｄｉｆｉｅｄ ＱｕＥＣｈＥＲＳ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｗａｓ ｓｈｏｗｎ ｉｎ Ｆｉｇ． ５． Ｉｎ Ｆｉｇ． ５ａ （Ｃ１８ ｍａｔｅｒｉａｌ） ａｎｄ

Ｆｉｇ． ５ｂ （ Ｃ１８ ａｎｄ ＰＳＡ ｍａｔｅｒｉａｌｓ ）， ｔｈｅ ｓｏｒｂｅｎｔｓｗｅｒｅ ｏｂｖｉｏｕｓｌｙ ｃｈａｎｇｅｄ ｔｏ ｂｌｕｅ ｏｒ ｖｉｏｌｅｔ， ｆｕｒｔｈｅｒｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｉｎｇ ｔｈｅ ａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ ｏｆ ＭＧ ａｎｄ ＣＶ． Ａｓｔｈｅ ｆｏｕｒ ｄｙｅｓ ｗｅｒｅ ａｌｌ ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ ａｎｄ ｂａｓｉｃ ｃｏｍ⁃ｐｏｕｎｄｓ， ｔｈｅ ｅｌｅｃｔｒｏｓｔａｔｉｃ ａｔｔｒａｃｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｄｙｅｓａｎｄ ｓｉｌａｎｏｌ ｇｒｏｕｐｓ ｏｎ Ｃ１８ ｍａｔｅｒｉａｌ ｔｏｇｅｔｈｅｒ ｗｉｔｈｔｈｅ ｏｒｉｇｉｎａｌ ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉｃ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｌｅｄ ｔｏ ｌｏｗ ｒｅ⁃ｃｏｖｅｒｉｅｓ． Ｗｈｅｎ ＰＳＡ ｗａｓ ａｄｄｅｄ， ｔｈｅ ａｌｋａｌｉｎｅ ＰＳＡｅｎｈａｎｃｅｄ ｔｈｅ ｉｏｎｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｉｌａｎｏｌｓ ｂｏｔｈ ｏｎ Ｃ１８ａｎｄ ＰＳＡ， ｒｅｓｕｌｔｉｎｇ ｉｎ ｐｏｏｒ ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ．Ｆｉｇ． ４ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ ｏｆ Ｃ１８， ＰＳＡ ａｎｄ Ｃ１８ＳＡＸ ｍａｔｅｒｉａｌｓＦｉｇ． ５ Ｃｏｌｏｒ ｏｆ ａｄｓｏｒｂｅｎｔｓ ｉｎ ｌｏｗｅｒ ｌａｙｅｒｓ ａｆｔｅｒｄ⁃ＳＰＥ ｐｒｏｃｅｄｕｒｅ

ａ． Ｃ１８； ｂ． Ｃ１８ ａｎｄ ＰＳＡ； ｃ． Ｃ１８ＳＡＸ．

Ｔａｂｌｅ １ Ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｆｏｕｒ ｄｙｅｓ ａｆｔｅｒ ｄ⁃ＳＰＥ ｗｉｔｈｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ａｄｓｏｒｂｅｎｔｓＡｄｓｏｒｂｅｎｔ

Ｒｅｃｏｖｅｒｉｅｓ ／ ％ＭＧ ＣＶ ＬＣＶ ＬＭＧＣ１８ （５０．０ ｍｇ） ８６．８ ８４．８ ７３．６ ８７．７

Ｃ１８ （５０．０ ｍｇ） ａｎｄ ＰＳＡ （５０．０ ｍｇ） ４６．０ ４０．６ ７８．０ ８３．７Ｃ１８ＳＡＸ （５０．０ ｍｇ） １０１．４ １０２．２ ８３．５ ８７．６Ｉｎ ａ ｐｒｅｖｉｏｕｓ ｗｏｒｋ ［ ２６］， ｗｅ ｄｅｖｅｌｏｐｅｄ ａ ｒｅversed phase/stronganionexchangemixedmodestationaryphase (name dc18 sax， Fig. 4 ) basedonpolarcopolymerizedapproach.the c 18 saxmaterialpossessesc 18 andquaternaryammoniumgroups， whichcanprovidehydrophobicandelectrostaticinteractionsimultaneously.withc 18 saxasdspematerial、 thenonpolarandacidicinterferencesintheacetonitrilelayereadsorbedbythesorbent.meanwhile， thequaternaryammoniumgroupprovidedelectrostaticrepulsioninteractionagainstthebasicdyes.asshownintable1and fig.5c、 therecoverieswereintherangeof 8351 %-10219 % forthefourdyes， andthec 18 saxmaterialwasstillwhiteaftertheadsorption.con sequention c 18 saxmixedmodematerialsuperiortothemechanicalllymixedc 18 ad thesampleandavoidingadsorptionofdyes.ba ample on the above discussions、 thismethodwaseasilystreamlinedinthedeterminationofdyeresiduesinaquaticproducts.asshowninfig.6，particoncernstheextraction while partinvolvesthecleanupofthesamplewithdspematerial，andpartisforHPLCanalysiiiial

theperformanceoftheoptimizedapproachforthedeterminationofmg，CV，lcvandlmgdyeswasvalidatedwithrespecttothelinearity， 恢复交互复制辅助功能(LOD )和限制功能(loq )。

thecalibrationwasperformedwiththeuseofmatrixmatchedstandards.asshownintable 2，thefourdyesexpressedgooodlinearitiesintherangestheranged withcorrelationcoefficientsallabove 0998.inthespikedrangefrom 5to 25 mg/L，therecoverieswerebetween 8863 % and 11062 %，within

sionsof07%-35%and16%-54%，respectively.the lods (calculatedbysignaltonoiseratiof3 ) were3(2g/kgformg，1-9g 34g/kgforlcvand 241g/kgforlmg.andtheloqs (calculatedbysignaltonoiseratiof 10 ) were10(g/kgformg，6 3 g/kg for CV 70g/kgforlcvand803g/kgforlmg.theresultsindicatedthecapabilityandapplicabilityoftheoptimizedquechersmethodforthepretreeeter mentanddetectionofdyesiofdyesion ofdyedetermination:extraction/partitioning (cleanupbydispersivesolidphaseextractionmaterial (partii ) andHPLCanalysis )

table2matrixmatchedcalibrationsandvalidationdataforfishtissueanalytelinearrange/(mg/l )

correlationcoefficientspiked/(mg/l ) Recovery /%RSD/%

intraday(n=5) inter day (n=15 )敏感性LOD /

(g/kg ) loq/(g/kg ) )。

mg 0.5-100.0.999588.61.72.33.29.61097.91.72.8251031.51.6

cv 0.5-100.0.9995960.72.1.1.95.710105.41.2.325110.60.81.8

lcv 0.5-100.0.998595.81.4.223.470.21096.31.61.925101.234.2

lmg 0.5-100.0.999594.13.53.124.172.31092.80.73.125110.73.5.42.4 sample analysis

theoptimizedmethodwasappliedtodetectmg，CV，lcvandlmginfishsampleswhichwereboughtfromlocalsupermarket.theresultsoftwobatchobatchobatchobatched

thepresentstudydemonstratedthesimplicityandhighefficiencyofquecherspretreatmenthodcombinedwithplcforthefastanalysisoftriphip xchargec 18 wasappliedintheseparationofmg，LMG， cvandlcvwithgoodselectivityandpeakshape.the extraction/partitioninganddspeprocedureinquechersweresystematicallyinvestigated mixedmodeadsorbentwasemployedinthedspeprocedure， exhibitingbetterrecoverythanconventionaladsorbents.methodvalidationdatashowedsatisfactoryrecoveriesandprecisions.ontheontheontheontheotheotheontheothed

ZHU Chengyun，et al:fastanalysisofmalachitegreen，leucomalachite green， crystalvioletandleucocrystalvioletinfishtissuebasedonamodifiedquechersprocedurepresentmethodalsoexists.thedectionsensitivition inimumrequiredperformancelimit (mrpl ) for the dyes. Infuture work，msdetectorwillbeappliedfortheimprovement

[1] Arroyo D，Ortiz M C，Sarabia L A，et al. J Chromatogr A，2009，1216 (29 ) 5472[2] Zhang Z，Zhou K，Bu Y Q，et al.anaaal.j chromanall et al. Food Addit Contam，2012，29 )4) 602[4] Andersen W C，Turnipseeed et al. AnalChim Acta，2009，637 (1/2) 279 [5]

[6] Chen G Y，Miao S. J Agric Food Chem，2010，58 (12 ) 7109[7] Tarbin J A，Chan D，Stubbings G，et al. Anal Chim Acta，2009

[12] Shen Y D，Deng X F，Xu Z L，et al. Anal Chim Acta，2011，707 (1/2) 148 ) Xingw，He L，Yang H，etal.jscifood 89(13 ) et al. Malar J，2011，10:195 [ 15 ] Deng JC，Li L H，Yang X Q，etal.Fal 33(14 ) 150[16] Stubbings G，Tarbin J，Cooper A

[17] Lian Z R，Wang J T. Mar Pollut Bull，2012，64 (12 ) 2656[18] Li Y H，Yang T，Qi X L，et al. Anal Chim Acta，2008，624 lid et al.journalofhenanagriculturalsciences，2011，40 (2) 111[20] Paya P，Anastassiades M，Mack D，et al.analbies 389 (可选) et al.chinesejournalofchromatography，2012，30 (1) 91 )黄YC et al.chinesejournalofchromatography，2013，31 (7) 616 et al.chinesejournalofchromatoor 31 (11 ) 1116 ) 24 ) AguileraLuizm，Vidal J L M，RomeroGonzalez R，et al.J Chromatogr A，2008

[26] Wei J，Guo Z M，Zhang P J，et al. J Chromatogr A，2012，1246:129 [ 27 ] stellac，Rudaz S，Veuthey J L，et al.j chromatom

[ 29 ]张j c，Wei J，zhm，et al.chinesejournalofchromatography，2013，31 (1):79(30 ) Lehotaysj，Son K A，kwon