离子色谱的改进及食物中亚硝酸盐的检测

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journalofqingdaouniversityofscienceandtechnology (naturalscienceedition ) )。Vol. 31 No. 62010年

文章编号： 16726987(2010 ) 03025903离子色谱的改进及食物中亚硝酸盐的检测周贵忠、赵小青、孙静、李佳

(青岛科技大学环境与安全工程学院，山东青岛266042 )。采摘：改进了离子色谱电检测食品中亚硝酸盐的方法，优化了蔬菜、肉制品对牛奶中亚硝酸盐检测的预处理方法和详细的检测分析。 但是，检出限0 01g- 1

、线性范围0~ 5 mg L- 1

相关系数0 999，加标回收率105 %。 实验证明：经离子色谱检测、改进后的预处理方法检测亚硝酸盐精密度高，检出限低，快速稳定确实，为食物中亚硝酸检测提供了快速简单的方法。关键词：离子色谱； 食物； 亚硝酸盐； 预处理中图分类号： O 657. 32文献标识代码： A

analyzingnitriteinfoodwithimprovedionchromatography周桂中，赵小青，孙景，李家

(collegeofenvironmentandsafetyengineering，qingdaouniversityofscienceandtechnology，Qingdao 266042，China )abstract 3360 nitriteiondetectionbyionchromatography (IC )，o ne of effective ex aminatio nandanalysismethodsofnitrousacidsaltinfoodswasmainlyresearchedinthispaper。T he pretreatment of foo ds，including vegetables，ham and milk w ere also optimized andstudied. A s the results show ed，the limit o f nitrous w as 0 01 g g- 1

、corr elation co effi

cient w as more than 0 999，linear rang e w as 0 5 mg L- 1，and recovery rate w as

105 %.experimentsprovedthattheicwithoptimizedpretreatmenthadtheadvantageof simple and fast，high sensitivity，whichprovidedagoodchoicefornitriteiondetectionin foodKey words:IC； fo ods； nitro us acid salt； 保护受理日期： 20091012

简介周贵忠(1973 )，男，副教授亚硝酸盐作为食品添加剂之一被广泛使用但食物中亚硝酸盐残留量过高会对人体造成毒副作用：在人体内转化为亚硝胺，产生亚硝胺是早期发现的致癌物质[ 1]在[ 1]中亚硝胺除了致癌外

引起胎儿畸形和胎盘毒性[ 23]。 像蜡一样的食品在肉、香肠等的加工中，经常加入少量的亚硝酸盐防腐剂和增色剂，不仅防腐，而且使肉的颜色鲜艳因为有光泽，所以经常在火腿等肉制品中使用。 蔬菜也是如此日常生活必需的农产品是化肥，特别是氮肥的广泛使用时，蔬菜中亚硝酸盐残留量过高； 牛奶中允许亚硝酸盐标准为0 2 mg kg- 1普通奶

其中亚硝酸盐超标，不会造成高含量的地表盐碱土壤污染地下水和多种农业、非农业活动，污染地下硝酸盐含量上升，在环境微生物的作用下转化变成亚硝酸盐，可以通过食物链等进入乳制品中。 因为这是乳制品特别是婴幼儿最主要的消费者亚硝酸盐的检测也变得特别重要。目前应用离子色谱法检测食品中的亚硝酸盐经过推广，特别是在蔬菜和乳制品方面[ 46]。 但是预处理复杂、耗时、处理成本高(

青岛科技大学学报(自然科学版)第31卷

石墨柱C18 )等缺点。 另外，乳制品的沉淀剂选择还存在配制复杂、操作困难、处理后难以分开的问题吹毛求疵。 本研究采用离子色谱/电导率测定亚硝基酸根的检测方法得到了改进，该方法在食物中亚硝酸盐含量的检测更为快速简便。1试验和材料1. 1仪器和试剂

离子色谱配电检测仪，CIC100型，青岛盛汉色谱技术有限公司； 超声波清洗机，ZQ80型，温州天瑞制药机械有限公司； 离心机，TDL40B型，上海金鹏分析仪器有限公司。包括NaOH、Na2 CO3、NaHCO3、ZnSO4 7H2 O、Na2B4O7 10H2 O，均为分析纯。 实验用水去离子水。芹菜、菠菜、油菜、黄瓜，购自超市； 三种火腿在保质期内。4个品牌的纯牛奶(相同价格位)。

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NJ3A324阴离子分离柱(4(6mm！ 250mm； 清洗液(1)1 44 mmol L- 1Na2 CO3 1 35mmo l L

- 1

NaHCO3)、流速1(8mlmin- 1我要进去了

样品量300 L； 汉中CIC100五极电导测定、测量量程1 000 s，电流55 mA。1. 3样品预处理方法

用榨汁机匀浆蔬菜的可食部分，达到5 00 g放入250 mL带塞锥形瓶中，加入0.01mol- 1NaOH溶液25 mL，超声提取15 min，然后离开心中高速(转速4,000rmin- 1

(离心10 min、

将上清液稀释10倍后通过自制的氧化铝过滤柱(1 )然后用0 ) 45m滤膜过滤，上机测定。图1过滤柱实验装置fig.1文件管理器

将市售火腿粉碎，在50 mL烧杯中称10 00 g向其中加入15 mL饱和硼砂溶液，用玻璃棒搅拌，继续用70左右的去离子水向烧杯中各加入约20 mL搅拌，反复数次(总体积不超过100 mL )，使之沸腾从水浴中取出15 min，然后滴加ZnSO4溶液(0 42 )摩尔- 1

冷却至室温，直到蛋白质完全沉淀。 除外去除上层脂肪，溶液迅速用定性滤纸过滤，定容放入100 mL容量瓶中，稀释100倍后测定。取5 00 g纯乳样品于250 mL烧杯中加入水70 mL和NaOH溶液5mL(0)5mol ) )。- 1)混在一起

均匀，移至250 mL容量瓶中加入10 mLZnSO4溶液(0)0 15 mo l L- 1

、混合(不产生白色沉淀时，重新使用

在滴管中添加NaOH直到正好发生絮状沉淀，放置70水浴中加热15 min，取出冷却至室温，加水加热至时刻调整角度。 放置0.5小时，用0 45 m滤膜过滤稀释用100倍进行测量。2结果和讨论

2. 1样品预处理

2. 1. 1蔬菜预处理柱的制备蔬菜中含有色素、蛋白质、脂肪等大分子有机物质，这些物质污染分离柱，缩短柱降低寿命、灵敏度。 先辈们清除了大部分这些有机物质0直接通过0 45 m过滤器，或选择C18石墨柱[ 7]在，

但C18石墨柱成本较高，每根柱的市场价格较大大约十几元左右，整个实验大约需要十几瓶。 因为由于这个成本很大，实验室有局限性，所以详细讨论了最终选择中性色谱Al2 O3在以下方面为：)1)色谱Al2 O3过滤效果好，无需活化，常见硅凝胶入柱前需要活化，硅胶有一定的pH适应范围； )2) A l2 O3色谱柱成本低，取材方便，只是过滤器需要5 mL的注射器。 请先放在过滤器里

放入适当大小的脱脂棉，盖上定量滤纸，

再加上高约4 cm的色谱al2O3(75~150m )，最再盖一张滤纸。2. 1. 2肉制品和乳制品预处理沉淀剂的选择火腿和牛奶蛋白质的物理状态和化学性质

虽然都不一样，但是火腿中主要是固体蛋白质，经常使用的是ZnSO4作为沉淀剂，加入饱和硼砂溶液有两种方法一个是沉淀蛋白质，另一个是提取亚硝酸盐。牛奶中蛋白质为胶体状态，常用沉淀剂为3种：一为CH3 COOH和NaOH混合液； 第二个是

(CH3COO ) 2 Zn和k4[Fe(cn )6 ]共沉淀剂； 三是Zn(oh ) 2共沉淀剂，由ZnSO4和NaOH组成。CH3 COOH和NaOH的混合液[ 8]如：

去除蛋白质的效果

果实最好，但实验表明，沉淀后溶液浑浊。260

第三期周贵忠等：离子色谱改进及食物中亚硝酸盐的检测明显含有大分子物质，可对分离柱造成污染；基于(CH3COO ) 2 Zn和k4[Fe(cn )6 ]的共沉淀物处理标本时溶液不易明显，最终选择是首要的三种沉淀剂Zn(oh ) 2共沉淀剂，其沉淀效果是的。 然后在70水浴加热中立即沉淀，然后形成的沉淀很稳定。2. 2线性方程、相关系数及检出限调合号

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0~ 5 mg L

在- 1含量范围内，其峰面积

与浓度呈良好的线性关系，与其线性方程和相关系数如下： Y=- 5 457！ 1049 388！ 105

x，r=

0 999 621。

最小检出限为基线噪声与离子峰高度之比2倍和检测离子浓度积的计算用与上述相同的色谱进行下将1 mg L放在- 1的标准液上检查，NO-2

的检出限为0 01 g g- 1。2. 3精密度和回收率

在与标准样品相同的条件下利用菠菜样品重复5次样品注入，根据得到的峰面积计算出NO_2的

相对标准偏差为0 218 %，给出了该检测方法稳定性好。通过测定加标回收率测定样品的前处理方法

的准确性一般认为回收率在90 % ~ 120 %之间样品的处理方法是可行的。根据菠菜样品测定的离子浓度，加入样品中1 mg L装- 1标准溶液，然后按照蔬菜样品处

方法：获得样品溶液，连续进行3次样品测定，标准化收率为105 %。2. 4常见离子干扰为了否

_

2和Cl

-的保持时间接近，测定样品时品溶液中的Cl-如果浓度太高，否-2容易被

口罩由于检测结果误差较大，因此检测出了高含量Cl

-成分时，不得采用电导检测。 根据需要配备特殊检测器，可有效选择样品。例如，紫外线检测器，但是紫外线检测器对其他离子不起作用因为很敏捷，所以把其中的Cl-请处理后再测定，本研究所选择的食物中的Cl-含量都很低，NO-2因为几乎没有噪声，所以如果采用通常的方法，就可以实现电导的检测检测的目的。2. 5实际样品测量结果

本实验对4种新鲜蔬菜和4种纯乳制品及3种种植火腿肉进行详细测量，结果如表1所示。从表1可以看出，在检查的11个样本中，除了除菠菜亚硝酸盐超过国家标准外，还有其他蔬菜、牛奶火腿中的亚硝酸盐没有超标，表示市场上有售许多食品中亚硝酸盐的含量对人们的饮食是安全的请参阅。表1实际样品中的NaNO2检测数据

table1resultsofnano2in the samples/(毫克公斤)- 1）

蔬菜a芹

烹饪菠萝烹饪油烹饪黄色瓜火腿b甲丙牛奶c

A B C D

2555dldl985073dldldldldl注： DL超过离子色谱检出限，未检测到。 a .国家食物品标准# 4 0 mg kg- 1

； b .国家食品标准# 105毫克公斤- 1； c.

GB/T 5413 32- 1997。3结论

1 )选择中性色谱Al2O3柱，蔬菜中含有色素、蛋白质、脂肪等高分子有机物质使用Zn(OH ) 2作为共沉淀剂去除牛奶、火腿中的胶体蛋白质质量、预处理取得了满意的结果。2 )该方法的检出限为0 ) 01g- 1

、线性范围

周围0~ 5 mg L- 1

3 )在检测的11个样品中，菠菜亚硝酸盐除外超过国家标准，其他蔬菜、牛奶及火腿中的亚硝基酸盐没有超标。参考文献

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