关于中压柱的知识点

教育信息化2.0行动计划

经典柱色谱和低压柱色谱的分辨率一般有限，因为所用的分离材料颗粒一般较大。 要进一步提高制备色谱的分辨率，通常只能进一步减小材料粒子或加长色谱柱长度，从而增大色谱柱阻力，降低流动相流速。 另外，不同的洗涤溶剂，流动相的流速也有很大的差异，采用正相时，以环己烷为流动相时，采用流动相流速加快的反相，以水为流动相时，使用流速慢、正丁醇等高粘度的有机溶剂也能得到同样的结果。 为进一步提高制备色谱的分辨率，并确保快速分离速度，采用中压制备色谱是一种有效的方法。中压柱色谱与经典柱色谱和低压柱色谱相比需要更多的组件，最简单的配置是除色谱柱外，再加上能提供几十公斤压力的恒流泵。 中压柱色谱的工作原理是用恒流泵输送流动相，在样品阀上采集样品，用色谱柱分离样品后用检测器检测，记录仪记录，同时收集各馏分。 在实际工作中，不一定要买成套设备，往往是根据自己的研究需要和经费情况，分别购买合适的组件自行组装。 中压制备柱色谱一般由以下几个最主要的部件组成：恒流泵中压柱色谱除色谱柱外，唯一不能省去的是恒流泵。 恒流泵的类型很多，从高效液相中常用的泵到蠕动泵，都是恒流泵，即能以一定的流量输出液体。 不同的是，高效液相使用的泵通常要求最高压力达到40MPa，最大流量达到10mL/min，流量精度和准确性也较高。 低压柱色谱恒流泵压力为0.3-0.5MPa，中压柱色谱对泵的要求介于两者之间。 一个恒流泵能达到的压力越高，对输出流量的精度和准确度的要求也就越高。 实验室采购恒流泵主要考虑其能达到的最大压力最大流量，其次是精度和准确度。 目前使用的恒流泵大多为柱塞式往复泵。色谱柱多采用耐压钢化玻璃制成，自行装填色谱柱，最常用的分离材料颗粒大小为15-25微米和25-40微米。 在中压柱色谱中，湿法装填技术除了常用的经典柱色谱湿法装填外，一般采用匀浆法对小颗粒如小于20微米的分离材料进行装填。 最简单的干柱是用一般的柱色谱法装填柱后，连接安装好的柱和氮气瓶，打开氮气瓶开关和柱出口，使氮气瓶输出压力达到1.5MPa，高压气体压迫填料。 该方法装填的柱密度比湿法至少提高20%，有利于分离难分离的物质。检测器的使用是实现样品采集的好箭，可根据检测器信号的变化实现及时采集，检测器的检测范围、检测器的灵敏度、基线稳定性等参数决定了仪器性能的高低。自动馏分捕集器和进样阀在配置比较齐全的中压制备色谱中，一般有自动馏分捕集器和进样阀。 自动分离收集器分为以固定的时间间隔收集和以固定的流出滴数间隔自动调换收集两种模式。中压柱色谱的操作方法与经典柱色谱基本相似，以下以分离植物红豆杉中抗癌成分紫杉醇为例介绍其具体操作。

紫杉醇最早由美国Wani等人于1971年首先从短叶红豆杉的茎皮中分离得到，1979年美国Horwitz等人发现了良好的抗癌活性和独特的微管解聚抑制和微管稳定的作用机制。 1992年美国药品食品管理局正式批准作为治疗晚期卵巢癌的药物首次上市，临床还发现对肺癌、头颈部肿瘤、恶性黑色素瘤等有疗效。 证明中国红豆杉、东北红豆杉、云南红豆杉、西藏红豆杉等含有紫杉醇及紫杉烷类。 紫杉醇的分离中，其中的三尖杉磷碱结构非常相似，被认为最难去除。 首先，从红豆杉的树皮中提取提取物，用氯仿提取后，得到深褐色的物质。

教育信息化工作管理系统

谱峰1 (收集区间为1~9条)为大黄素类物质，谱峰2为未知物。 考虑峰3和峰2交叉，合并瓶号18~28的洗脱液，减压浓缩，得到乙醇重结晶、白色结晶、mp258~260C； 紫外光下蓝色荧光IR(KBR，cm ) 3280、1600、1580、1409、1151； 以上数据与文献值一致，反3，4，5 -三羟基二苯乙烯，即白藜芦醇。 HPLC测定产物纯度为99.28%。 0-1反相硅胶柱怎么放入柱中？ 用什么溶剂装的？ 有什么注意事项吗？反相硅胶柱怎么放入柱中？ 用什么溶剂装的？ 有什么注意事项吗？

答：一般用甲醇装柱，沉降后用起始溶剂(一定比例的甲醇-水)置换即可。 请注意不要使用超声波。 破坏ODS。 由于粒子细小，流速变慢，通常可以用中压柱提高流速。反相柱湿法采集标本时，样品宜用初始洗脱剂溶解，还是用纯甲醇或水溶解？A )能溶解的最好用初期洗脱剂溶解，如果不能的话尽量用接近初期洗脱剂比例的体系溶解。

高职高专是什么学历

上司(导师)最近购买了瑞士BUCHI的中压柱系统。 填料为C18，我手黄酮)单体纯度为98%左右，但有明显杂质，试图在此基础上分离。 我使用了HPLC、岛津C18柱、150mm、甲醇-水=70:30的条件，目标黄酮为2.5，但是用中压色谱柱试验丙酮水=70:30、100mL/min后，完全没有区别我现在用了半箱丙酮，但是没有效果。 有谁伟大的人告诉我的吗？ 谢谢你告诉我如何在中压下分离黄酮。可以用丙酮代替液相中取出的甲醇吗？ 两者的溶出能力一致吗？ 用丙酮-水=70:30走hplc，见过分离效果吗？ 2.5分钟出现高峰太早了。 不能将这个条件直接适用于中压。 我在此将部分化合物的分离hplc保留时间定为10min，然后将相应洗脱溶剂有机相的比例降低一半，应用于中压，必要时可类似梯度。用于buchi的C18柱填料的粒径是多少？ 40~60um的？ 这个分辨率很低，请试试20~40um的东西。 这个色谱柱性能相当高，buchi的设备也能承受这么高的压力。另外，正如二楼先生所说，应该先用丙酮接触HPLC，看能否分离，然后线性放大到MPLC。中压柱压力约为50ba，c18填料应该买什么样的？ ）

我首先看到了你的需求。 300-400也可以。 只要洗脱液能下来。 在压力允许的情况下，应尽量选择细填料，以获得高柱效应。

本人试用了50m的ODS C-18填料，为2.2cm50cm，基本可以在常压下分离。 利用液相改造裂解仪和检测器，流速为2.5ml/min，压力也不超过10bar。楼主这个问题很具体，可以问一下专业的公司。 谢谢在楼上。 决定买40-60m。 据说40-60的人可以常压溶出。 以防万一。